"Stereotyp-Barbie" (Margot Robbie) lebt im Barbieland mit ihren Freundinnen: anderen Plastikpuppen-Versionen von ihr. Obwohl ihr Leben unter den vielen Barbies und deren Begleitern, den Kens, perfekt erscheint, hegt sie eines Tages Selbstzweifel und wird von Angstgefühlen geplagt. Daraufhin verlässt sie Barbieland und reist mit ihrem Begleiter Ken (Ryan Gosling) in die reale Welt nach Los Angeles, um die Ursache des Problems zu suchen. Dort irritiert sie das Verhalten der Menschen. Gleichzeitig ist sie auf der Suche nach ihrer langjährigen Besitzerin, die sie glaubt, in der frechen Teenagerin Sasha (Ariana Greenblatt) gefunden zu haben. Währenddessen entdeckt Ken auf einem Spaziergang durch die Stadt, dass im Gegensatz zum Barbieland in der realen Welt ein Patriarchat herrscht. Er kehrt nach Barbieland zurück und baut auch dort ein ebensolches auf, wobei die dort verbliebenen Barbies nach einer Gehirnwäsche willig mitspielen ...
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